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食源性緻病菌及養殖病害的現場檢測方法

時間:2020年09月15日 09:55    來源:    作者:    閱讀:

 

特異性核酸擴增是核酸檢測技術的基礎。以PCR反應為基礎的核酸擴增檢測技術已發展成熟并廣泛應用,但一直存在設備及人員依賴度高的問題。重組酶聚合酶擴增(RPA)技術借鑒T4噬菌體DNA的重組複制過程開發而來,是繼T4連接酶、T4 DNA聚合酶等之後,T4噬菌體研究對生物技術和生物工具領域的又一大貢獻。RPA檢測技術對設備及操作人員的專業度要求很低,保持了核酸檢測固有的高特異性及高靈敏度,能夠實現快速檢測,是PCR類核酸檢測技術的良好補充,尤其在疾病即時診斷(POCT)和食品安全、公共衛生的現場檢測(in-field detection)中有巨大應用前景。在重要病原體檢測方面,RPA技術已有較多應用,包括鼠疫、炭疽、埃博拉病毒、MERS的檢測等。由于RPA的等溫擴增特性及固有的高靈敏度,其檢測應用帶有來自引物二聚體的内源性假陽性風險。本項目針對RPA核酸檢測的這個短闆開展了系列研究,向領域内提出了來自引物二聚體的内源性假陽性風險,并尋找消除該風險的一般規律。這項研究有助于RPA技術更好的應用于實際檢測,目前已發表系列研究論文4篇,申報國家發明專利10件。其中首篇論文于2019年12月被國際知名期刊Frontiers in Microbiology接收,另外3篇論文也于2020年第一季度分别被Frontiers in Microbiology、BMC Veterinary Research和Journal of Food Science這3個國際知名期刊接收。該檢測技術對于新型冠狀病毒SARS-CoV-2的大規模核酸檢測具有很好的應用前景,比現有的qPCR技術更先進、簡便、快速。。

成果形式:新技術、新工藝

技術指标

檢測時間小于30分鐘;

檢測靈敏度在1-20拷貝之間;

與非目标病原無交叉反應。

創新點:該技術具有快速、靈敏、簡便、特異性和靈敏性高等特點,可應用于食源性微生物和畜牧、漁業養殖緻病病原的現場檢測。

成熟程度:成熟

合作方式:技術開發、技術咨詢、技術服務

成果完成人:董井泉

聯系人: 戴紅偉 聯系電話:0518-85895123

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